思考

Pierce社の試薬は昔から時々使っていた。

Pierceが買収されたので名前が変わってややこしい。
Fisherっていうバイオ機器とか実験施設家具を扱ってた会社に
買収されたらしく、今ではThermo Fisher Scientific Inc.の一員らしい。

で、そのPieceの限外濾過デバイス（コニカルチューブタイプ）が今
キャンペーンで安くなってるというチラシを見た。


　上にタンパク溶液を入れて
　遠心するの



でもね、ピアスの限外濾過tubeって、ダメダメなのよ。

10年くらい前に、一度購入して試したの。

10K cut-off　のやつで、パーオキシダーゼ（POD、分子量4万ちょい）
を濃縮してみた。

パーオキシダーゼはヘムタンパクで、色が着いてるから目視で
様子がわかるのよ。オレンジがかった茶褐色。


いざ、遠心してみたら・・・・下部の溶液にも色が着いてるではないか！


参考資料として、Vivaspinの画像


　cut-off値よりも大きいものは上部
　小さいものは下部（濾液）
　
　左図の場合、たぶんブルーデキストランかな？
　濃縮できたものが上部の青色
　低分子（バッファー類）が下部の透明な方

　PODなら左図青色がオレンジがかった茶褐色
　となる,



メンブレンの穴が1万、PODが4万

ろ液にPODが移行するはずないのに・・・！
残渣（濃縮されるはずの上部の液）と濾液の色がほぼ同じ！！

めっちゃ、つうつうやんっ

ってことがあったので、Pierceの限外濾過系は危ないので買わないことにした。

購入業者に文句言ってみたけど、営業マンが原理を理解できなかった
らしく、こっちが何言ってんのかわかんなかったみたいなの。
言ったのは、「色がついてるのがタンパク、この色はメンブレン孔より大きい
から上にいれた色が小さい孔を通って下に行くわけないの」。
・・・彼は全く理解できなかったらしい。

あれから改良されてるのかもしれないけどコワくて買えない。



透析カセットもキャンペーンみたいだけど、限外濾過デバイスがヤバいのに
大丈夫かよ、って思っちゃうわ。透析中にタンパク全部抜けちゃったりしてｗ





限外濾過デバイス買うなら、Amicon（ミリポア）かVivaspin（ザルトリウス）
が無難なところ。ただ、Vivaspinはメンブレンから紫外部吸収の何かが
濾液に溶出してくるのを経験したので濾液が必要なら要洗浄。
量が多い場合はPallの遠心濾過デバイス（Jumbosep）がいいかな。